rtpcr的原理及步骤
rtpcr操作步骤?？
rtpcr操作有5个步骤⭐️🎎——_🐰。具体操作如下🎉——-🥇😟：1🌾😖-😉、总RNA提取🦜😙_😿🎖。DEPC处理水溶解RNA🐼🐪|*，20℃保存🐇🦆_-🧸🦒，备反转录之用🐱🦔——🦡。2🥇🤢|🌚🐁、反转录🦉😁_🌛🦂。按下列组成调制反应液🧩||😸🤒：样品总RNA 1μg✨——😍；随机引物或oligo-dT(18-20) 100pmol😶-🍄；脱氧核苷三磷酸(每种dNTP各l0mmol／L) 1μl☄️🦙|🎽🦚；反转录缓冲液(5×) 4μl🐪||🐱；RNase抑制剂(20~40U等我继续说🤥😙————⚾。
3🐂🌦_|🐸、RT-PCR反应将上述加好模板的反应管混匀🐉-☀️，短暂离心后放入PCR仪进行RT-PCR扩增🎰——_🏸✨，反应程序如下🪴👺|——😉🥏： 温度(C) 时间循环数60℃ 1min 1 42℃ 10min 50℃ 30min 95℃ 15min 94℃ 30s 35 52℃ 30s 72℃ 1min 72℃ 7min 1 4℃ 保存4🐕🦺🎰——_🎐、RT-PCR产物检测1)2.0%琼脂糖凝胶制备🐗-🌵：称取2.0g Agarose,倒入耐热等会说*🐱_——🦅。
rtpcr操作有5个步骤⭐️🎎——_🐰。具体操作如下🎉——-🥇😟：1🌾😖-😉、总RNA提取🦜😙_😿🎖。DEPC处理水溶解RNA🐼🐪|*，20℃保存🐇🦆_-🧸🦒，备反转录之用🐱🦔——🦡。2🥇🤢|🌚🐁、反转录🦉😁_🌛🦂。按下列组成调制反应液🧩||😸🤒：样品总RNA 1μg✨——😍；随机引物或oligo-dT(18-20) 100pmol😶-🍄；脱氧核苷三磷酸(每种dNTP各l0mmol／L) 1μl☄️🦙|🎽🦚；反转录缓冲液(5×) 4μl🐪||🐱；RNase抑制剂(20~40U等我继续说🤥😙————⚾。
3🐂🌦_|🐸、RT-PCR反应将上述加好模板的反应管混匀🐉-☀️，短暂离心后放入PCR仪进行RT-PCR扩增🎰——_🏸✨，反应程序如下🪴👺|——😉🥏： 温度(C) 时间循环数60℃ 1min 1 42℃ 10min 50℃ 30min 95℃ 15min 94℃ 30s 35 52℃ 30s 72℃ 1min 72℃ 7min 1 4℃ 保存4🐕🦺🎰——_🎐、RT-PCR产物检测1)2.0%琼脂糖凝胶制备🐗-🌵：称取2.0g Agarose,倒入耐热等会说*🐱_——🦅。
